Проводка этиловый спирт-ксилол — метод, используемый чаще других из-за широкой доступности и популярности реактивов. На ткани, обезвоженной в этиловом спирте, было сделано много исследований и написано большое количество научных публикаций. Однако, этиловый спирт и ксилол являются достаточно жёсткими реагентами, требующими неукоснительного соблюдения расписания проводки: при избыточном нахождении в этих реагентах кусочки ткани становятся ломкими и плотными. При микротомии таких блоков могут получаться срезы с артефактами в виде жалюзи и чередования темных и светлых полос.
Сегодня мы рассмотрим ручной способ проводки ткани на этиловом спирте-ксилоле, обсудим некоторые аспекты его использования.
Ручной метод проводки материала
Независимо от объёма емкости, в которой вы проводите, соблюдайте правильное соотношение количества реактивов и блоков. Итак, при соблюдении простых правил можно получать объекты хорошего качества.
Гарантия качества этапа проводки хирургического материала
1. Толщина вырезаемых объектов для проводки — не более 3 мм, жир — не более 2 мм. Заполняемость кассеты не более 75% внутреннего объема.
2. Фиксация: 10% нейтральный забуференный формалин не менее 24 и не более 72 часов.
3. Количество кассет в литровой ёмкости — не более 40, а реактива 900 мл. Или соотношение реагент/кусочек должно быть на уровне 20/1.
4. Количество смен этилового спирта 95-96% — 5. Смена выполняется ежедневно выливанием первого и ротацией остальных на одну позицию влево (последний чистый). Возможна задержка тканей в первом спирте на необходимый срок (до нескольких суток).
5. Ни один из спиртов не должен быть мутным.
6. Количество смен ксилола — 3. Смена осуществляется еженедельно выливанием первого, второго на место первого (последний чистый).
7. Количество смен парафина 4. Температура термостата должна быть установлена выше точки плавления парафина на 4°С. Смена выполняется еженедельно выливанием первого, ротацией остальных на одну позицию влево (последний чистый).
8. Смесь ксилол/парафин 1/1 при 37-40°С до утра — промежуточная смесь, позволяющая оставить объекты без избыточного уплотнения до утра. Смена — еженедельно на свежий раствор.
Расписание гистологической проводки хирургического материала.
Этанол 1 час
Этанол 1 час
Этанол 1 час
Этанол 1 час
Этанол 1 час
Ксилол 1 час
Ксилол 1 час
Ксилол 1 час
Парафин/ксилол 1/1 до утра.
Парафин 1 час
Парафин 1 час
Парафин 1 час
Парафин 1 час.
Желательно не откладывать заливку.
Гарантия качества этапа проводки эндоскопических биоптатов
- Толщина для проводки — не более 2 мм.
2. Фиксация: 10% нейтральный забуференный формалин не менее 24 и не более 72 часов.
3. Количество кассет в литровой ёмкости — не более 45, а реактива 900 мл. В любом случае кассеты всегда быть должны покрыты реактивом.
4. Количество смен этилового спирта 95-96% — 3. Смена выполняется ежедневно удалением первого (в отходы), ротацией остальных на одну позицию влево и последний чистый. со временем концентрация спиртов постепенно выровняется в возрастающий ряд. Это при условии проводки ежедневно полной емкости с кассетами. Если кассет меньше половины каждый раз, то смену реагентов можно делать в 2 раза реже (справедливо для каждого этапа).
5. Ни один из спиртов в проводке не должен быть мутным!
6. Количество смен ксилола — 3. Смена осуществляется через 2 недели выливанием первого, второго на место первого (последний чистый).
7. Количество смен парафина — 3. Температура термостата выше точки плавления парафина 4°С. Смена выполняется через 2 недели выливанием первого, ротацией остальных на одну позицию влево (последний чистый).
8. Смесь ксилол/парафин 1/1 при 37-40°С до утра — промежуточная смесь, позволяющая оставить объекты без избыточного уплотнения до утра. Смена через 2 недели на свежий.
Расписание гистологической проводки эндоскопических биоптатов.
Этанол 15 мин
Этанол 15 мин
Этанол 15 мин
Ксилол 15 мин
Ксилол 15 мин
Ксилол 15 мин
Парафин/ксилол 1/1 — оставить на ночь. Можно не включать этот реагент, если перерыва на ночь нет.
Парафин 20 мин
Парафин 20 мин
Парафин 20 мин.
Не откладывайте заливку, иначе материал будет пересушен!
Нарушение любого из этих правил может существенно повлиять на качество конечного препарата.
Комитет лаборантов-гистотехников Российского общества патологоанатомов