Проводка без ксилола. Изопропанол – минеральное масло

Здравствуйте, коллеги!
Сегодня в «Образователе» расскажем вам об одном инновационном методе проводки гистологического материала. В этом методе используется изопропиловый спирт, не подлежащий строгому учёту (как этанол) и просветлитель минеральное масло, которое не токсично и не имеет запаха. Этот способ обработки сохраняет структуру ткани лучше других методов, которые мы описывали ранее.

Изопропиловый спирт — минеральное масло — парафин

Проводка с минеральным маслом в качестве просветлителя — ещё один метод с безопасными заменителями ксилола, получивший распространение в последние 10 лет. Минеральное масло представляет собой жидкий парафин, смесь алифатических углеводородов алифатического строения. Не содержит ароматических углеводородов. Не имеет запаха. Используется в ручном варианте, карусельном и вакуумном процессорах. Для каждого из этих методов проводки время выдерживания в реагентах практически не отличается. Объекты в становятся такими же прозрачными, как и в ксилоле, но не уплотняются и не становятся хрупкими, даже после длительного пребывания в масле (в отличие от ксилола и хлороформа).

Расписание для биопсий и хирургических объектов

Биопсии

1. Изопропанол 30 мин
2. Изопропанол 30 минут
3. Промежуточная смесь 1 – 30 мин
4. Промежуточная смесь 2 – 30 мин
5. Минеральное масло – 30 мин
6. Парафин 20 мин
7. Парафин 20 мин
8. Парафин 20 мин.

Общее время: 3 часа 30 мин

Хирургические образцы

1. Изопропанол 1 час
2. Изопропанол 1 час
3. Изопропанол 1 час
4. Изопропанол 1 час
5. Изопропанол 1 час
6. Промежуточная смесь I– 1 час 30 минут
7. Промежуточная смесь II– 1 час 30 мин
8. Минеральное масло – 1 час 30 мин (можно оставить до утра или на несколько дней)
9. Парафин 1 час
10. Парафин 1 час
11. Парафин 1 час
12. Парафин 1 час.

Общее время: 13 часа 30 мин

Важно соблюдать правила взятия и фиксации образцов, тогда при любом методе проводки можно получать диагностически пригодные препараты для рутинной работы. Но используя минеральное масло в качестве просветлителя удаётся избежать токсичного воздействия паров ксилола или хлороформа и добиться лучших результатов в сохранении целостности ткани и дифференцировки структур.

Преимущества этого метода проводки состоят в том, что используются заменители ксилола, безопасные для персонала лаборатории.

Ткань, проведённая этим способом, лучше воспринимает красители, а значит, на выходе мы получаем лучше дифференцированные друг от друга структуры, и врачам легче ставить диагноз по таким препаратам.

Ниже приведены фоторгафии препаратов, проведённых с использованием минерального масла.

1 — ткань кости, гематоксилин — эозин, 400х;   

2 — ткань кожи, гематоксилин — эозин, 10х;

3 — легкие крысы, лаброцит, Романовский — Гимза, 100х;

4 — мягкие ткани, воспаление, Романовский — Гимза, 40х;

5 — подкожно-жировая клетчатка, Ван Гизон, 40х; 

6 — ворсинчатая оболочка плаценты, Martius-Scarlet-Blue, 10х;

7 — легкие, пневмоцистная пневмония, Gomori — methenamine silver, 10x;

8 — колонии актиномицетов, Грам, 100х