ГистологияОбразователь

Проводка без ксилола. Изопропанол – минеральное масло

Здравствуйте, коллеги!
Сегодня в «Образователе» расскажем вам об одном инновационном методе проводки гистологического материала. В этом методе используется изопропиловый спирт, не подлежащий строгому учёту (как этанол) и просветлитель минеральное масло, которое не токсично и не имеет запаха. Этот способ обработки сохраняет структуру ткани лучше других методов, которые мы описывали ранее.

Изопропиловый спирт — минеральное масло — парафин

Проводка с минеральным маслом в качестве просветлителя — ещё один метод с безопасными заменителями ксилола, получивший распространение в последние 10 лет. Минеральное масло представляет собой жидкий парафин, смесь алифатических углеводородов алифатического строения. Не содержит ароматических углеводородов. Не имеет запаха. Используется в ручном варианте, карусельном и вакуумном процессорах. Для каждого из этих методов проводки время выдерживания в реагентах практически не отличается. Объекты в становятся такими же прозрачными, как и в ксилоле, но не уплотняются и не становятся хрупкими, даже после длительного пребывания в масле (в отличие от ксилола и хлороформа).

Расписание для биопсий и хирургических объектов

Биопсии
  1. Изопропанол 30 мин
  2. Изопропанол 30 минут
  3. Промежуточная смесь 1 – 30 мин
  4. Промежуточная смесь 2 – 30 мин
  5. Минеральное масло – 30 мин
  6. Парафин 20 мин
  7. Парафин 20 мин
  8. Парафин 20 мин.

Общее время: 3 часа 30 мин

Хирургические образцы
  1. Изопропанол 1 час
  2. Изопропанол 1 час
  3. Изопропанол 1 час
  4. Изопропанол 1 час
  5. Изопропанол 1 час
  6. Промежуточная смесь I– 1 час 30 минут
  7. Промежуточная смесь II– 1 час 30 мин
  8. Минеральное масло – 1 час 30 мин (можно оставить до утра или на несколько дней)
  9. Парафин 1 час
  10. Парафин 1 час
  11. Парафин 1 час
  12. Парафин 1 час.

Общее время: 13 часа 30 мин

Важно соблюдать правила взятия и фиксации образцов, тогда при любом методе проводки можно получать диагностически пригодные препараты для рутинной работы. Но используя минеральное масло в качестве просветлителя удаётся избежать токсичного воздействия паров ксилола или хлороформа и добиться лучших результатов в сохранении целостности ткани и дифференцировки структур.

Преимущества этого метода проводки состоят в том, что используются заменители ксилола, безопасные для персонала лаборатории.

Ткань, проведённая этим способом, лучше воспринимает красители, а значит, на выходе мы получаем лучше дифференцированные друг от друга структуры, и врачам легче ставить диагноз по таким препаратам.

Ниже приведены фоторгафии препаратов, проведённых с использованием минерального масла.

1 — ткань кости, гематоксилин — эозин, 400х;   1 — ткань кости, гематоксилин-эозин; 2 — ткань кожи, гематоксилин-эозин; 3 — тучная клетка, Гимза; 4 — ; 5 — .

2 — ткань кожи, гематоксилин — эозин, 10х;
Проводка без ксилола. Изопропанол – минеральное масло, изображение №2
3 — легкие крысы, лаброцит, Романовский — Гимза, 100х;
Проводка без ксилола. Изопропанол – минеральное масло, изображение №3
4 — мягкие ткани, воспаление, Романовский — Гимза, 40х;
Проводка без ксилола. Изопропанол – минеральное масло, изображение №4
5 — подкожно-жировая клетчатка, Ван Гизон, 40х; 
Проводка без ксилола. Изопропанол – минеральное масло, изображение №5
6 — ворсинчатая оболочка плаценты, Martius-Scarlet-Blue, 10х;
Проводка без ксилола. Изопропанол – минеральное масло, изображение №6
7 — легкие, пневмоцистная пневмония, Gomori — methenamine silver, 10x;

8 — колонии актиномицетов, Грам, 100х