ГистологияОбразователь

О качестве проводки ткани

Здравствуйте, коллеги! 👋🏻
С вами рубрика «Образователь», и сегодня поговорим о проводке. 🦉Если материал слишком мягкий, и для его резки необходимо увеличивать количество микрон, это говорит о недостаточности предыдущих этапов.
Чтобы проверить, хорошо ли проходит дегидратация, нужно пустить в проводку правильно зафиксированную ткань — таким образом мы исключим недостаточность этапа фиксации.❓Как обычно мы понимаем, что ткань не провелась?
— в кусочке ткани при надавливании выделяется вода;
— срез не получается, материал крошится или «намазывается», как масло;
— такой материал, полежав в блоке сутки и более, сжимается в размерах и деформируется (появляются вдавления из-за усыхания).
Однако, «британские учёные», как всегда, отличились.
Мы перевели рекомендации одной европейской лаборатории, где проверяли качество проводки. В них говорится о добавлении небольшого количества эозина в предпоследнюю ёмкость со спиртом в проводке (спирт должен быть концентрированный). Это не повлияет на последующие процессы окрашивания, а мы сможем увидеть уровень проникновения реагента, подкрашенного эозином, — говорят англоязычные специалисты. Если дегидратация неполная, мы увидим красную кайму вокруг участка, в который не проник спирт. 💢
Такой материал — только в перепроводку.💦 Если обезвоживание было неполным, то следует ожидать плохого просветления ткани в ксилоле и недостаточного пропитывания её парафином, поэтому на выходе мы имеем слишком мягкие образцы, которые сложно тонко порезать.

Так как реагенты проникают внутрь ткани по законам диффузии, немаловажным фактором для качественного прохождения материала по этапам фиксации и проводки является размер вырезаемых кусочков, а именно — толщина образцов. Thick cut tissue is the curse of the processing. 😈

🥢Также важно заполнять гистологические кассеты не более, чем на 75% и размещать материал так, чтобы он не был придавлен или сжат крышкой кассеты.
⚠Запуская материал в проводку, необходимо проверить, достаточно ли места для проникновения реагентов и накрывает ли раствор все кассеты.
❗При помещении образцов в гистопроцессор следует соблюдать количество кассет, на которое рассчитан данный аппарат, не превышая его, чтобы растворы свободно циркулировали между кассетами.