При поддержке ООО «Рош Диагностика Рус».
Антитела к CD4 — трансмембранному гликопротеину суперсемейства иммуноглобулинов, маркеру Т-хелперов/Т-индукторов. Практический протокол иммуногистохимического окрашивания, контроль качества и разбор типичных вариантов сигнала.
Антитело к CD4 (anti-CD4) вступает в реакцию с трансмембранным гликопротеином CD4, который относится к суперсемейству иммуноглобулинов и связан с распознаванием антигенов главного комплекса гистосовместимости II класса. CD4 экспрессируется на поверхности Т-хелперов/Т-индукторов, большинства тимоцитов, а также моноцитов, макрофагов, дендритных клеток и гранулоцитов. Антиген CD4 отсутствует у незрелых тимоцитов и появляется в процессе развития Т-клеток.
CD4 служит общим маркером Т-клеток; используется для классификации лимфом и воспалительных заболеваний. CD4 рекомендуется применять в комбинации с CD3, CD5, CD7, CD8 и bcl-2.
CD4-позитивны в норме: Т-хелперы/Т-индукторы, тимоциты (80–90 %), гранулоциты, макрофаги, клетки Лангерганса и дендритные клетки. Около 45 % лимфоцитов периферической крови CD4-позитивны. В лимфатической ткани CD4-позитивные Т-клетки в большом количестве присутствуют в парафолликулярных зонах, отдельные клетки — в зародышевых центрах и мантийных зонах. CD4-позитивные клетки также обнаруживаются в пристеночных клетках селезёнки и синусоидальных клетках печени. Иммунореактивность с CD4 с использованием антител к Leu3a и OKT4D выявлена как в нормальных, так и в аномальных паращитовидных железах.
CD4-позитивные опухоли: опухоли из предшественников Т-клеток (Т-лимфобластный лейкоз/лимфома), опухоли из зрелых Т-клеток (Т-клеточный пролимфоцитарный лейкоз, Т-клеточный лейкоз из больших гранулярных лимфоцитов, грибовидный микоз, синдром Сезари, лимфоматоидный папулёз, ALK-позитивная/ ALK-негативная анапластическая крупноклеточная лимфома, нодальные лимфомы из фолликулярных Т-хелперов), дендритно-клеточные и гистиоцитарные/макрофагальные новообразования (бластная опухоль из плазмоцитоидных дендритных клеток, ювенильная ксантогранулема, болезнь Эрдгейма — Честера), острый миелоидный лейкоз (М4, М5).
CD4-негативные опухоли: некоторые Т-клеточные лимфомы (энтеропатическая Т-клеточная лимфома, мономорфная эпителиотропная кишечная Т-клеточная лимфома, интестинальная Т-клеточная лимфома, БДУ, экстранодальная NK/Т-клеточная лимфома, первичная кожная агрессивная эпидермотропная CD8-позитивная цитотоксическая Т-клеточная лимфома), опухоли из предшественников В-клеток, опухоли из зрелых В-лимфоцитов, лимфома Ходжкина.
Ткани в парафиновом блоке
Мембрана клеток
В качестве основного позитивного и негативного тканевого контроля рекомендуется использовать миндалину и печень. При правильно валидированном иммуногистохимическом протоколе Т-хелперы/индукторы имеют чёткое и яркое мембранное окрашивание. Макрофаги зародышевого центра должны окрашиваться как минимум умеренно и чётко. В других клетках, в том числе в В-клетках и эпителиальных клетках миндалины, окрашивание отсутствует.
Клетки Купфера и эндотелиальные клетки в синусоидных капиллярах печени при правильно подобранном протоколе должны окрашиваться как минимум умеренно и отчётливо; гепатоциты не окрашиваются или окрашиваются слабо.
В качестве дополнительной контрольной ткани возможно использовать червеобразный отросток. Все Т-хелперные/индукторные клетки демонстрируют сильную и отчётливую реакцию мембранного окрашивания; макрофаги зародышевого центра проявляют слабую или умеренную интенсивность. В В-клетках и эпителиальных клетках аппендикса реакция окрашивания не наблюдается.
Каждое изображение можно заменить — для этого измените атрибут src у соответствующего тега <img>.
| Параметр | Roche (SP35) | Cell Marque (SP35) |
|---|---|---|
| Клон | SP35 | SP35 |
| Производитель | Roche | Cell Marque |
| № продукта / № лота | 790-4423 / J14781 | 104R-14/15-16 / 153754 |
| Формат | Ready-To-Use (prediluted) | Concentrate |
| Дилоент | Нет | Antibody Diluent |
| Производитель дилоента / № | — | Dako / K8006 |
| Титр | — | 1:50 |
| Время инкубации / температура | 24 мин / 36 °C | 32 мин / 36 °C |
| Параметр | Roche (SP35) | Cell Marque (SP35) |
|---|---|---|
| Прибор | On Board / On Machine | On Board / On Machine |
| Буфер | Ventana Ultra CC1 | Ventana Ultra CC1 |
| Время нагрева при макс. температуре | 32 мин | 48 мин |
| Максимальная температура нагрева | 100 °C | 99 °C |
| Параметр | Roche (SP35) | Cell Marque (SP35) |
|---|---|---|
| Производитель | Ventana | Ventana |
| Продукт / номер | OptiView DAB IHC Detection Kit / 760-700 | OptiView DAB IHC Detection Kit / 760-700 |
| Время инкубации линкера | 8 мин | 8 мин |
| Время инкубации полимера | 8 мин | 8 мин |
| Температура инкубации | 36 °C | 36 °C |
| Параметр | Roche (SP35) | Cell Marque (SP35) |
|---|---|---|
| Производитель | Ventana | Ventana |
| Продукт / номер | OptiView DAB IHC Detection Kit / 760-700 | OptiView DAB IHC Detection Kit / 760-700 |
| Время инкубации / температура | 8 мин / 36 °C | 4 мин / 36 °C |
| Усилитель | CuSO₄ | CuSO₄ |
| Ventana Benchmark Ultra | Ventana Benchmark Ultra |
Ассоциация специалистов в области лабораторной гистотехнологии прилагает все усилия для предоставления точной и актуальной информации. Однако мы не даём гарантии относительно точности предоставленной информации (содержания и протоколов иммуногистохимического окрашивания), соответствующей последним достижениям в области иммуногистохимии на любой момент времени.