При поддержке ООО «Рош Диагностика Рус».
Антитела к общему лейкоцитарному антигену (LCA, PTPRC). Практический протокол иммуногистохимического окрашивания, контроль качества и разбор типичных вариантов сигнала.
Антитело CD45 (LCA) вступает в реакцию с протеинтирозинфосфатазой, известной как рецептор C (Protein tyrosin phosphatase, receptor C, PTPRC) — общим лейкоцитарным антигеном (leucocyte common antigen, LCA). Общий лейкоцитарный антиген представляет собой трансмембранный гликопротеин, имеющий по меньшей мере шесть изоформ у человека. Все они имеют общий внутриклеточный домен и сильно гликозилированные внеклеточные домены. Изоформы образуются в результате альтернативного сплайсинга мРНК трёх экзонов (экзоны 4–6).
CD45 обладает собственной тирозинфосфатазной активностью и играет важную роль в передаче сигналов, ингибировании или активации различных иммунологических функций. Ген расположен на хромосоме 1q31-32. CD45 экспрессируется исключительно на клетках кроветворной линии, за исключением зрелых эритроцитов. Он не обнаруживается на дифференцированных клетках других тканей. Изоформы обозначаются как RABC, RAB, RBC, RB, RA и RO и экспрессируются в различных подтипах гемопоэтических клеток.
CD45-позитивны почти все гемолимфоидные клетки, включая клетки-предшественники и зрелые B- и T-лимфоциты, гранулоциты, моноциты/гистиоциты, а также клетки ретикулума и фолликулярные дендритные клетки. CD45-позитивно подавляющее большинство гематолимфоидных новообразований: в целом около 90 % злокачественных лимфом являются CD45-положительными. Доля таких новообразований ниже среди B-клеточных pre-B-клеточных новообразований (80 % B-клеточного острого лимфобластного лейкоза) и крупноклеточных анапластических лимфом, и только около 10 % плазмоцитарных новообразований являются CD45-положительными.
При лимфоме Ходжкина клетки лимфоидного и гистиоцитарного ряда в лимфоидной ткани всегда позитивны, в то время как клетки Рида — Штернберга при классической лимфоме Ходжкина негативны или имеют слабо выраженное цитоплазматическое окрашивание. CD45 также обнаруживается практически во всех случаях тучноклеточных новообразований, а также истинных гистиоцитарных и дендритных клеточных новообразований, за исключением, возможно, фибробластических вариантов.
Ткани в парафиновом блоке
Мембрана клеток
В качестве положительного и отрицательного тканевого контроля рекомендуется использовать миндалину и печень. В миндалине все лимфоциты (B- и T-клетки) и гистиоциты должны давать выраженную отчётливую реакцию в виде мембранного окрашивания. Плоский эпителий должен давать отрицательную реакцию. В печени клетки Купфера должны давать слабую или умеренную реакцию окрашивания, а гепатоциты — отрицательную. В печени можно обнаружить рассеянные лимфоциты, которые должны давать выраженную отчётливую реакцию в виде мембранного окрашивания.
При оценке окрашивания следует учитывать, что клетки Купфера в норме экспрессируют CD45 на более низком уровне по сравнению с лимфоцитами — допускается слабая или умеренная мембранная реакция. Граничащие с ними гепатоциты, эпителий желчных протоков и стромальные клетки не должны окрашиваться.
Каждое изображение можно заменить — для этого измените атрибут src у соответствующего тега <img>.
| Параметр | Ventana / Roche (RP2/18) | Ventana (2B11+PD7/26) |
|---|---|---|
| Клон | RP2/18 | 2B11+PD7/26 |
| Производитель | Ventana / Roche | Ventana |
| № продукта / № лота | 760-2505 / F12392 | 760-4279 / V0001596 |
| Формат | Ready-To-Use (prediluted) | Ready-To-Use (prediluted) |
| Время инкубации / температура | 32 мин / 36 °C | 16 мин / 36 °C |
| Параметр | Ventana / Roche (RP2/18) | Ventana (2B11+PD7/26) |
|---|---|---|
| Прибор | On Board / On Machine | On Board / On Machine |
| Буфер | Ventana Ultra CC1 | Ventana Ultra CC1 |
| Время нагрева при макс. температуре | 40 мин | 36 мин |
| Максимальная температура нагрева | 100 °C | 96 °C |
| Параметр | Ventana / Roche (RP2/18) | Ventana (2B11+PD7/26) |
|---|---|---|
| Производитель | Ventana | Ventana |
| Продукт / номер | OptiView DAB IHC Detection Kit / 760-700 | UltraView Universal DAB Detection Kit / 760-500 |
| Инкубация линкера | 8 мин | — |
| Инкубация полимера | 8 мин | 8 мин |
| Температура инкубации | 36 °C | 36 °C |
| Параметр | Ventana / Roche (RP2/18) | Ventana (2B11+PD7/26) |
|---|---|---|
| Производитель | Ventana | Ventana |
| Продукт / номер | OptiView DAB IHC Detection Kit / 760-700 | UltraView Universal DAB Detection Kit / 760-500 |
| Время инкубации / температура | 8 мин / 36 °C | 8 мин / 36 °C |
| Усилитель | Нет | CuSO₄ |
| Ventana Benchmark Ultra | Ventana Benchmark Ultra |
Ассоциация специалистов в области лабораторной гистотехнологии прилагает все усилия для предоставления точной и актуальной информации. Однако мы не даём гарантии относительно точности предоставленной информации (содержание и протоколов иммуногистохимического окрашивания), соответствующей последним достижениям в области иммуногистохимии на любой момент времени.
